Кришнамурти К. и др. Переваривание углеводов у шиншиллы (Chinchilla lanigera)
Тип статьи:
перевод
Вид статьи:
экспериментальная статья
Активность мальтазы, сахаразы и лактазы в пищеварительном тракте взрослой шиншиллы (Chinchilla lanigera) максимальна в средней трети тонкого кишечника и отсутствует в желудке и толстом кишечнике. Кишечная сахараза, мальтаза и амилаза поджелудочной железы были низкого уровня при рождении, но увеличивались до уровня взрослых животных через 12 недель. Лактаза достигала пика активности в возрасте 2 недель и резко снижалась за 3 недели до низких значений, обнаруженных у взрослых.
Используя оксид хрома в качестве маркера, было обнаружено, что скорость, с которой гранулированный корм проходит через пищеварительный тракт шиншиллы, составляла около 35 часов. Степень расщепления целлюлозы и усвояемости сухого вещества у шиншилл, потребляющих гранулы составляла 47,5 и 68,4%, в то время как при рационе из сена и гранул, она составляла 48,9 и 57,9% соответственно. Целлюлоза переваривалась в основном в толстом кишечнике с образованием летучих жирных кислот в концентрации 0,492-0,547 мэкв / г сухого содержимого. Молярный процентный состав уксусной, пропионовой и масляной кислот в содержимом слепой кишки составлял 71,2, 11,3. и 14,1% соответственно.
Вступление
Хотя шиншилла (Chinchilla lanigera) одомашнена в течение почти 50 лет, и её экономическое значение в качестве роскошного пушного зверя хорошо упрочнилось, очень мало известно об их пищевых потребностях. В практических условиях одна и та же диета скармливается на всех этапах производственного цикла. Следовательно, потенциал для роста и производства меха не выражен полностью. Кроме того, на относительно непродуктивных стадиях некоторых животных кормят больше, чем требуется, что, очевидно, неэкономично. Поэтому было сочтено необходимым изучить процесс пищеварения у шиншиллы в надежде, что знание количества и типа питательных веществ, которые животное способно использовать на разных этапах своей жизни, будет способствовать составлению рационов для более эффективного производства. Изменения активности углеводов в желудочно-кишечном тракте в течение роста шиншиллы, а также местоположение и конечные продукты усвоения целлюлозы (клетчатка) у взрослых животных были рассмотрены в этой статье.
Материалы и методы
Активность карбогидразы в желудочно-кишечном тракте
Животные, использованные в этом исследовании - Chinchilla lanigera, были выращены в Исследовательском отделе пушных животных Университета Британской Колумбии. Их кормили ad libitum (без ограничения) один раз в день коммерческим гранулированным рационом (National Feeds, Abbotsford, British Columbia), содержащим 15,2% сырого белка и 1800 ккал метаболизируемой энергии на килограмм. Сено люцерны и вода были доступны в любое время.
Шиншиллят мужского пола периодически умерщвляли с рождения до 12 недель и определяли изменения активности кишечной лактазы, мальтазы и сахаразы. Сразу после смерти содержимое желудка, тонкого и толстого кишечника промывали ледяной дистиллированной водой с рН измеренной с помощью pH-метра (радиометра). После удаления жира и брыжейки, тонкий кишечник разрезали на три равные по длине части и гомогенизировали раздельно в пестике и ступке при 0 °С. Дисахаридазы экстрагировали четырьмя объемами ледяного 0,15 М NaCl, экстракты центрифугировали в течение 10 минут в охлаждаемой центрифуге Sorvall. До анализа супернатант хранили замороженным при -20 °С. Гомогенаты желудка и толстого кишечника готовили аналогичным образом. Ферментативную активность содержимого пищеварительного тракта также определяли после гомогенизации аликвоты с таким же количеством ледяного солевого раствора и центрифугирования.
Оптимальные значения рН для лактазы, мальтазы и сахаразы определяли по количеству глюкозы, высвобождаемой из дисахаридных субстратов в буферах с различным рН, с использованием формулы Далквиста (1964), а концентрацию ферментов в экстрактах оценивали с использованием буфера в котором была получена максимальная активность. Белок определяли по методу Lowry et al. (1951), глюкозу по методу оксидазы трис(гидроксиметил)аминометана, о котором сообщал Dahlqvist (1964).
Поджелудочная железа была гомогенизирована с девятью объемами 0,01 М хлорида кальция в ступке и пестике, гомогенат был центрифугирован, супернатант анализировали на активность амилазы в течение 48 часов. Активность альфа-амилазы поджелудочной железы и кишечника анализировали колориметрической оценкой редуцирующих групп, полученных из крахмала с использованием 3,5-динитросалицилатного реагента (Fisher and Stein 1961).
Переваривание целлюлозы у взрослых
Эксперимент I
Скорость прохождения питательных веществ через желудочно-кишечный тракт изучалась с использованием четырех взрослых самок шиншиллы. Животных помещали в метаболитические клетки, держали голодными в течение 24 часов, а затем кормили базальным гранулированным рационом, в который был добавлен 2% оксид хрома. Потребление помеченного корма регистрировали в течение следующих 24 ч, а затем возобновляли регулярный рацион из гранул и сена. Образцы фекалий при нормальном опрожнении собирали с интервалами 18, 24, 30.5, 35, 43 и 56 ч после кормления и анализировали на содержание оксида хрома по методу Schuerch et al. (1950).
Эксперимент 2
Местоположение и конечные продукты переваривания целлюлозы были изучены с использованием четырех взрослых самок шиншиллы, помещенных в обычные клетки. Им давали гранулированный рацион, содержащий 2% оксида хрома, в течение 2-недельного предварительного периода. Сеном в этот период их не кормили, но вода была в свободном доступе. Регистрировалось ежедневное потребление корма, и каждый день в течение 6 дней собирали репрезентативный образец кала. В конце периода сбора животных умерщвляли эфиром и количественно удаляли содержимое из разных областей желудочно-кишечного тракта. Итоговое количество летучих жирных кислот (ЛЖК) в содержимом измеряли паровой дистилляцией и титрованным раствором щелочи. Целлюлозу в объединенных образцах фекалий и желудочно-кишечном содержимом определяли по методу Крамптона и Мейнарда (1938) и по хромовой кислоте, как было описано ранее. Переваривание целлюлозы в разных отделах желудочно-кишечного тракта оценивали путем сравнения соотношений целлюлозы и оксида хрома.
Эксперимент 3
Влияние добавления сена люцерны на усвояемость целлюлозы и выработку ЛЖК было изучено путем помещения четырех взрослых самок животных в метаболитические клетки на 10-дневный период адаптации, в течение которого они получали ad libitum гранулы сена люцерны и ad libitum гранулы корма для шиншилл. После этого периода животных кормили только пеллетами в течение предварительного периода 7 дней и периода сбора 6 дней. Выделение фекалий и потребление корма регистрировались ежедневно. Затем была определена общая перевариваемость сухого вещества и целлюлозы в корме. Кормление сеном и пеллетами ad libitum возобновлялось во второй предварительный период продолжительностью 7 дней, после чего регистрировалось ежедневное потребление сена и гранул, а также собиралось общее количество фекалий. Животные были умервщлены после 6-дневного периода сбора, содержимое их желудочно-кишечного тракта анализировали на целлюлозу и обще количество ЛЖК. Пропорцию отдельных ЛЖК в содержимом определяли газожидкостной хроматографией в соответствии с процедурой, описанной Ross and Kitts (1972).
Результаты и обсуждение
Активность карбогидразы в желудочно-кишечном тракте
Активность дисахаридазы в гомогенатах и содержимом пищеварительного тракта взрослой шиншиллы приведена в таблице 1. Ни гомогенаты желудка и толстого кишечника, ни содержимое желудка не обладали дисахаридазной активностью. Гомогенаты тонкого кишечника, с другой стороны, легко гидролизировались мальтазой и сахаразой и медленно гидролизировались лактазой. Активность всех трех изученных ферментов была максимальной в средней трети тонкого кишечника, соответствующей дистальной части тощей кишки и проксимальной части подвздошной кишки. Схожее распределение дисахаридов в тонком кишечнике собаки, морской свинки и свиньи было отмечено Malhotra и Phillip (1965) и Welsch and Walker (1965).
Высокая активность мальтазы и сахаразы в кишечном содержимом, наблюдаемая в этом исследовании (таблица 1), не согласуется с результатами, полученными у других животных (Semenza 1967), либо согласуется с современными теориями, касающимися местонахождения активности дисахаридазы (Miller and Crane 1961). Эти ферменты действуют внутриклеточно, имеет место небольшая диффузия в просвет кишечника. Однако возможно, что часть слизистой оболочки могла быть удалена во время сбора содержимого кишечника, и это может объяснить кажущуюся повышенную активность содержимого.
Активность мальтазы и сахаразы в содержимом толстого кишечника составляет примерно 40,8 и 9,5% соответственно от активности в тонком кишечнике. Поскольку организмы, ферментирующие крахмал и простой сахар были найдены в слепой кишке лошади (Hungate 1966), животного, сходного по строению пищеварительной системы с шиншиллой, кажется возможным, что активность мальтазы, наблюдаемая в содержимом толстого кишечника, может иметь бактериальное происхождение.
Независимо от возраста животного средний уровень рН содержимого желудка, тонкого кишечника и толстого кишечника составлял 3.4, 7.1 и 7,9 соответственно. Оптимальное значение pH для сахаразы, мальтазы, и лактазы в гомогенатах стенки тонкого кишечника было 6.4, 6.0 и 4,6 соответственно. Активность каждого фермента по отношению к максимальной активности при 100% в зависимости от pH показана на рис. 1. Значения для сахаразы и мальтазы соответствуют диапазону, полученному для собаки (pH 6.0, Welsch and Walker 1965), свиньи (pH 6.5, Dahlqvist 1961), крысы (pH 5.8, Rubino et al. 1964) и человека (pH 7.0, Auricchio et al. 1965). Оптимальный рН для лактазы колеблется от рН 5.0 у собак (Welsch and Walker 1965) до рН 6.0 у свиней и крыс (Dahlqvist 1961). Следовательно, значение рН 4.6, полученное для шиншиллы, ниже, чем для большинства других видов млекопитающих. Тот факт, что анализы кишечных гомогенатов животных в возрасте от 1 до 2 недель также давали результат в виде активной лактазы с оптимальным значением рН 4,6, указывает на то, что этот фермент имеет физиологическое значение для данного вида.
Изменения в уровнях лактазы, сахаразы и мальтазы наблюдались у шиншилл от рождения до зрелости (рис. 2). Сахараза отсутствовала при рождении, но начала увеличиваться между 3 и 5 неделями, достигая уровня взрослого животного в возрасте от 12 до 16 недель. Уровень мальтазы оставался низким до 4-недельного возраста, а затем быстро увеличивался и достигал уровня взрослого животного после 12-й недели. Лактаза была самым активным из трех ферментов и росла до пика активности в 2 недели. Затем она резко снижалась в течение 3х недель до низких уровней, характерных для взрослого животного.
|
Относительная активность (%)
|
Рис. 1. Оптимальное значение рН кишечной лактазы, сахаразы и мальтазы у шиншиллы.
Таблица 1. Активность дисахаридаз в пищеварительном тракте трех взрослых самцов шиншиллы
|
Исследуемая часть желудочно-кишечного тракта
|
Ферментативная активность +- SEM, * ед. / Мг белка
|
||
|
Мальтаза
|
Сахараза
|
Лактаза
|
|
|
Стенка тонкого кишечника
Проксимальная часть
Средняя часть
Дистальная часть
|
35.45± 5.7a
77.27± 17.3c
22.02± 2.6a
|
13.91± 1.7b
27.40± 9.5b
7.16 ± 0.8b
|
5.15± 1.7d
6.99± 1.1d
5.28± 1.6d
|
|
Содержимое
Тонкий кишечник
Слепая кишка
Толстая и прямая кишка
|
127.91± 15.5b
49.25 ± 6.7a
73.23 ± 10.4a
|
39.95± 14.2b
4.17 ± 4.2b
3.35 ± 3.4b
|
-
-
-
|
* Среднее значение каждого фермента в пределах интервала или содержания, имеющего общие индексы, статистически не различаются (P <.05). SEM = стандартная ошибка среднего значения.
Изменения активности ферментов являются отражением характера корма, потребляемого животным на разных этапах его роста, и относительного развития органов пищеварения с возрастом, особенно слепой кишки. В 5 недель было обнаружено, что содержимое желудка состоит примерно из 90% зеленого корма, остальное - молоко, что значительно превышает относительный показатель его количества у 2х-недельного животного. Данный факт совпадает с уменьшением активности лактазы в это время. При рождении слепая кишка как таковая не существует; к 7 дням в толстой кишке появляется небольшая складка, а к 14 дням в этой части кишечника отмечается заметное увеличение размера кишки.
Слепая кишка сопоставима по размеру и сложности со взрослым животным к 5-недельному возрасту, когда животное полностью способно переваривать сложные полисахариды. Кроме того, именно в это время наблюдается быстрое увеличение активности мальтазы и сахаразы, а также снижение уровня лактазы до уровня взрослых животных, что совпадает с изменением характера питания. Хотя уровень сахаразы возрастает в возрасте от 6 до 12 недель, он остается довольно низким по сравнению с мальтазой даже у взрослых животных. Поскольку рацион взрослого животного содержит значительное количество сахарозы, это говорит о том, что может происходить активная ферментация этого сахара микробами в толстом кишечнике.
Амилаза поджелудочной железы была незначительной при рождении, но возрастала довольно быстро с возрастом и оставалась на относительно постоянном уровне после 12 недель (рис. 2). Удельная активность амилазы в поджелудочной железе, содержимом тонкого и толстого кишечника трех взрослых шиншилл составляла 14.59 ± 3.15, 0.94 ± 0.01 и 0.55 ± 0.06 соответственно. Активность амилазы, обнаруженная в кишечном содержимом, согласуется с внутрипросветным распадом крахмала.
Гомогенаты желудка и стенок толстого кишечника не обладали амилазной активностью, но содержимое толстого кишечника имело почти 50% активности по сравнению с содержимым тонкого кишечника. Является ли эта активность следствием амилазы бактериального происхождения в толстом кишечнике или амилазы поджелудочной железы, остающейся в пищеварении, неясно.
|
|
|
Удельная активность Активность амилазы
(единицы на мг белка) * 103 (единицы на мг белка)
|
Возраст в неделях
Рис.2. Активность кишечных дисахаридаз и амилазы поджелудочной железы как функция возраста у шиншиллы. (Каждая точка представляет одного детеныша)
Переваривание целлюлозы у взрослых
Эксперимент I: Скорость прохождения рациона через желудочно-кишечный тракт
Скорость, с которой гранулированный корм проходит через пищеварительный тракт шиншиллы, определятся концентрацией оксида хрома в кале. Окись хрома впервые была отмечена в кале через 18 ч после кормления помеченным кормом (рис. 3). Основная часть оксида хрома выводилась через 30-45 часов после кормления, в среднем 35 часов. Раннее появление оксида хрома в кале было, вероятно, вызвано 1-дневным голоданием до кормления помеченным рационом. Более высокое потребление корма, наблюдаемое в это время, могло привести к начальному увеличению скорости. Кроме того, шиншилла испражнялась мало или вообще не испражнялась в дневное время, что делало первоначальные попытки визуально зафиксировать первое появление маркера в кале безуспешными. Время прохождения рациона через ЖКТ у шиншиллы сравнимо с таковым у лошади и морской свинки, которые похожи на шиншиллу из-за наличия большой слепой кишки и способности переваривать целлюлозу. Vander Noot et al. (1967) обнаружили, что скорость прохождения у лошадей, вскармливаемых рубленым сеном люцерны, была максимальной между 36 и 48 часами. Из результатов, полученных в этом исследовании, можно сделать вывод, что период сбора фекалий после испытаний на усвояемость должен составлять не менее 4 дней.
|
Оксид хрома (%)
|
Время после еды (часы)
Рис.3. Время прохождения гранулированного корма через пищеварительный тракт шиншиллы.
Эксперимент 2: место и конечные продукты усвоения целлюлозы
Процент переваривания целлюлозы в желудке и толстом кишечнике и общий уровень ЛЖК в этих областях приведены в таблице 2. Результаты показывают, что большая часть процесса расщепления целлюлозы у шиншиллы происходит в толстой кишке. Это подтверждается высокой концентрацией ЛЖК в этой области.
Корректность значений усвоения целлюлозы, обнаруженных в желудке, сомнительна. Не только значительные различия между животными, но и низкий уровень pH содержимого желудка не способствуют активности целлюлолитических организмов (Hungate 1966). Кажущееся усвоение целлюлозы, а также наличие ЛЖК в желудке могли быть связаны с копрофагией.
Таблица 2
Усвоение целлюлозы и производство летучих жирных кислот в пищеварительном тракте шиншилл, потреблявших коммерческий гранулированный рацион (эксперимент 2).
|
№ животного
|
Параметр
|
Желудок
|
Слепая кишка
|
Ободочная и прямая кишка
|
Общее усвоение целлю-лозы*
|
|
24
|
Усвоение целлюлозы (% от общего усвоения)
ЛЖК((Мэкв / г)
|
8.03
0.012
|
48.6
0.272
|
48.8
0.153
|
59.1
|
|
26
|
Целлюлоза
ЛЖК((Мэкв / г)
|
-
0.007
|
40.0
0.353
|
43.5
0.290
|
53.5
|
|
11
|
Целлюлоза
ЛЖК((Мэкв / г)
|
17.5
|
42.5
|
45.9
|
49.1
|
|
Среднее
|
Целлюлоза
ЛЖК
|
8.52 ±2.12
0.014±0.003
|
43.7±1.47
0.316±0.014
|
46.1±0.88
0.231±0.024
|
53.9±1.67
|
*Усвоение целлюлозы (%) = концентрация целлюлозы в фекалиях / концентрацию целлюлозы в пище х Cr2O3 в пище/Cr2O3 в фекалиях х 100.
Эксперимент 3
Степень расщепления целлюлозы и усвояемости сухого вещества в у шиншилл, которых кормили гранулами, составляла 47,5 и 63,40%, а у тех, которым скармливали сено и гранулы, составляла 48,9 и 57,9% соответственно. Не наблюдалось значительных изменений массы тела в течение 4 недель эксперимента, независимо от того, получали ли животные только гранулы или гранулы и сено. Это наблюдение в сочетании с тем фактом, что не было выявлено внешних признаков расстройства пищеварения, таких как количество и консистенция фекалий или беспорядочное потребление корма при кормлении только гранулами, позволяет предположить, что в целях большинства испытаний на перевариваемость у шиншилл удаление сена из рациона не оказывает вредного физического воздействия. Тем не менее, кормление сеном в полевых условиях может быть полезным для предотвращения недостатка массы тела и для отвлечения внимания от самопогрызания меха (Larrivee Elvehjem 1954).
Количество и молярный процент ЛЖК в слепой кишке, ободочной кишке и прямой кишке шиншиллы приведены в Таблице 3. На основании относительной концентрации ЛЖК слепая кишка и толстая кишка, по-видимому, являются основными местами расщепления целлюлозы. Yang et al (1969) сообщили, что крысы могли переваривать целлюлозу независимо от наличия слепой кишки, хотя цекэктомия снизила усвоение целлюлозы с 37 до 25%. Общее количество ЛЖК, производимых в толстом кишечнике шиншилл, питающихся сеном и пеллетами, составляло 0,492 мэкв / г сухого вещества содержимого кишечника. Это количество сопоставимо с производимым в слепой кишке свиньи, кролика и крысы (Elsden et al. 1946). Когда животных кормили только гранулами, общее количество ЛЖК было немного выше (0,547 мэкв / г) (эксперимент 2), что свидетельствует о более быстрой ферментации. Относительные молярные пропорции ЛЖК (таблица 3) указывают на то, что уксусная кислота является преобладающей жирной кислотой, получаемой при ферментации целлюлозы, а пропионат и бутират образуются в равных пропорциях. Количество ЛЖК вырабатываемых за день и их вклад в энергетические потребности шиншиллы заслуживают дальнейшего изучения. Значительная абсорбция ЛЖК происходит в толстом кишечнике, о чем свидетельствует заметное снижение концентрации всех трех ЛЖК в прямой кишке по сравнению со слепой кишкой и ободочной кишкой.
Таблица 3
Летучие жирные кислоты в толстом кишечнике четырех взрослых шиншилл, которых кормили сеном из люцерны и коммерческими гранулами (эксперимент 3)
|
Летучие жирные кислоты
|
Слепая кишка
|
Ободочная кишка
|
Прямая кишка
|
|
Уксусная
мэкв/г сухого вещества
Молярный%
|
182.4
72.2
|
121.7
72.7
|
44.9
67.0
|
|
Пропионовая
мэкв/г сухого вещества
Молярный%
|
27.5
11.3
|
20.5
12.1
|
11.3
16.0
|
|
Изомасляная
мэкв/г сухого вещества
Молярный%
|
2.16
1.02
|
4.61
2.73
|
1.07
1.58
|
|
Масляная
мэкв/г сухого вещества
Молярный%
|
35.8
14.1
|
22.1
13.1
|
8.30
12.10
|
|
Изовалериановая
мэкв/г сухого вещества
Молярный%
|
1.77
0.51
|
3.55
2.11
|
1.20
1.86
|
|
Валериановая
мэкв/г сухого вещества
Молярный%
|
1.59
0.69
|
1.28
0.76
|
0.99
1.49
|
Использованные источники:
AURICCHIO, S, S. RUBNO, and G. MURSET.1 965. Intestinal glycosidase activities in the human embryo, fetus and newborn. Pediatrics, 35: 944-954.
CRAMWONE. E. W. and L. W. MAYNARD1.9 38. The relation of cellulose and lignin content to the nutritive value of animal feeds. J. Nutr. 15: 383-395.
DAHLQVISTA, A. 1961. The location of carbohydrases in the di estive tract of the pig. Biochem. J. 78: 282-288.
ELSDENS, S. R., M. W. S. H~CHCOCKR,. A. MARSHALL and A. T. PHILLIPSON1. 946. volatile acid in the digests of ruminants and other animals 22: 191-202.
FISCHERE, . H., and E. A. STEIN.1 961. Amylase from human saliva. In Biochemical preparations. Vol. 8. John Wiley and Sons Inc., New York. p. 27-33.
Hungate. R.E. 1966. The rumen and its microbes. Academic Press. p. 60.
LARRIVEEG, . P.9 and C. A. ELVEHJEM19. 54Studies on the nutritional requirements of chinchilla. J. Nutr. 52: 427-436.
LOWRY,O. H., N. J. ROSEBROUGHA, . L. FARR, and R. J. RANDALL1. 951. Protem measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 193: 265-275.
MALHOTRA0, . P., and G. PHILLIP. 1965. Hydrolytic enzymes of mammalian intestines. Part 11. Distribution of hydrolytic enzymes in dog, guinea pig , squirrel, albino rat and rabbit intestines. J. d e.d. R ~53~: 410-416.
Mtum. D., and R. K. CRANE1.96 1. The digestive function of the epithelium or the smali intestine. 11. Localization of disaccharide hydrolysls in the Isolated brush border portion of intestinal rpthelinl cells. Biochlrn. Rioyhys. Acla, 52: 293-298.
Rvsmo, A., F. ZIMEALAan~d, S. Auarcm Intestinal, disaccharidase activilies in adult and suckling rats. Biochim. Bio~hys.Acta, 92: 305-31 1 .
SCHLRCH, A. F., L. E. LLOYDa,n d E. W. CRAMPTON. 1950. The use of chromic oxide as an index for determining di estibility of a diet. J. Nuir. 41 : 629,
SEMENZA. 0. 19h. klccted topics in carbohydrate biocharnistrr: digytion and absorption of sugars in the imestina tract Canes Kes. 1: 187-207.
VANDERN OOTG, . W., L. D. SYMONRS., K. LYDMAN and P. V. FONNESBEC1K96. 7. Rate of passage of various
feedstuffs through the digestive tract of horses. J. Anim. Sci. 26: 1309-1 31 1.
WELSCHJ, . D., and A. WALKER1. 965. Intestinal disaccharides and alkaline phosphatase activity in the dog. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 120: 525-527.
YANG,M . G., K. MANOHARA aNn,d A. K. YOUNG.19 69. Influence and degradation of dietary cellulose in cecum of rats. J. Nutr. 97: 260-264.
Авторы:C.R. Krishnamurti, W.D. Kitts, and Diana C. Smith
Department of Animal Science, The University of British Columbia, Vancouver, British Columbia
Received April 4, 1974
Перевод на русский язык: В.В. Дадижа
Редакция перевода: Д.В. Михайлов
Отдельная благодарность за помощь в редактировании Е.К. Климочкиной
C.R. Krishnamurti, W.D. Kitts and Diana C. Smith. TThe digestion of carbohydrates in the chinchilla (Chinchilla lanigera) // CAN. J. ZOOL. VOL. 52, 1974, 1227-1233
Файл с оригиналом статьи:
Все права защищены.
Использование материалов (текста и изображений) разрешается при условии ссылки на "Социальную сеть любителей шиншилл CHINBOX" (chinbox.online). Для интернет-изданий обязательной является прямая гиперссылка, не закрытая от индексации поисковыми системами (отсутствие в ссылке rel="nofollow" или ‹noindex› ), в первом или втором абзаце опубликованного материала (ссылка должна быть в тексте).