Гистоплазмоз был диагностирован гистопатологически у самки шиншиллы. Это животное было из коммерческого ранчо в центральной части Миссури. 17 из 130 животных в колонии умерли в течение месяца от респираторного заболевания. Об этом животном сообщалось, что оно занималось самопогрызанием меха, но это не относится ко всем другим животным, которые погибли. Histoplamsma capsulatum культивировали из сена тимофеевки, используемого для еды.
Гистоплазмоз является относительно распространенным заболеванием человека, собак и некоторых других видов животных в довольно четко определенных эндемичных районах (4, 8): в Северной Америке, особенно в долине реки Миссисипи и ее притоков (4). Организм существует в гифальной форме в неиспользуемых курятниках и птичниках или других подходящих средах с высоким содержанием влаги и органических веществ. Как только микроорганизмы попадают в восприимчивого хозяина путем вдыхания переносимых по воздуху спор, они начинают проникать в ткани в первой фазе почкования дрожжей.
Ранее в Европе сообщалось о появлении Histoplasma capsulatum у шиншиллы (1). Тем не менее, это первое сообщение о спонтанно возникающем гистоплазмозе у шиншилл в Соединенных Штатах.
Методы
Шесть взрослых шиншилл возрастом приблизительно один год были переданы в Ветеринарно-медицинскую диагностическую лабораторию Университета Миссури-Колумбия для обследования 31 октября 1968 года. Одно животное было живым, а другие были мертвы и заморожены при поступлении в лабораторию.
Вскрытие было проведено у всех шести животных. Животное, которое было представлено живым, было подвергнуто эвтаназии, а образцы тканей были извлечены в асептических условиях из нескольких органов и отправлены на микробиологическое исследование. В то время как был взят образец для микробиологии, дубликат образца был взят и помещен в 10% буферный формалин для последующего гистопатологического исследования.
Ткани, представленные для бактериологического культивирования, инокулировали на триптиказно-соевом агаре, обогащенном 5% дефибринированной овечьей крови и агаром МакКонки. Эти две среды были использованы для культивирования всех тканей. Кроме того, для культивирования отдельных органов использовались агары Сабуро и Микозеля.
Образцы влажного заплесневелого сена, используемые в качестве корма, и древесные щепки, используемые в качестве подстилки, анализировали на наличие H. capsulatum при инокуляции животных. Десять граммов каждого образца смешивали со 100 мл стерильного физиологического раствора и встряхивали в течение 60 минут. Шести домовым мышам инокулировали внутрибрюшинно 2 мл супернатанта из каждого образца. Мышей умерщвляли и вскрывали через 1 месяц после инокуляции. Печень и селезенку удаляли асептически у каждого животного в соответствующих группах, объединяли и гомогенизировали в стерильном измельчителе Брука, аликвоты по 0,5 мл каждой суспензии были инокулированы на дублирующие предметные стекла с декстрозным агаром Сабуро. Кроме того, также были инокулированы два предметных стекла Mycosel и две емкости агара для сердечно-мозговой вытяжки с 5% дефибринированной овечьей крови, добавленной для обогащения. Все планшеты инкубировали при 25-28 ° С и ежедневно исследовали на предмет роста.
История
Шиншиллы, которые были вскрыты, принадлежали к первоначальной группе из 130 особей. Семнадцать животных погибли в течение 1 месяца. Клинически все, по проявлениям, страдали от острого респираторного заболевания. До этого времени в группе не возникало чрезмерных смертей или болезней. Некоторые из погибших животных занимались самопогрызанием меха, но других проблем не было.
Изначально ферма находилась в подвале частного дома в Колумбии (округ Бун), штат Миссури, с марта 1966 года по март 1968 года. Затем их перевезли в Ролла (округ Фелпс), штат Миссури, где они оставались до тех пор, пока в октябре 1968 года не начались заболевания и смертельные исходы. За прошедший год в группу не было внесено никаких новых дополнений. Подобные методы ведения хозяйства соблюдались в обоих местах. Животных содержали в клетках с подстилкой из ореховой или сосновой древесины, которую меняли еженедельно. Их диета включала коммерческий гранулированный корм для шиншилл, витаминную добавку, сено тимофеевки и воду. Для предотвращения микотических кожных инфекций и улучшения качества меха иногда использовалась в качестве песчаной ванны смесь каптана (Imperial Chemical Industries) и фуллеровой земли.
Клиническими симптомами, наблюдаемыми у пораженных животных, были анорексия, сопровождаемая потерей веса, запорами и учащением дыхания. Выделений из глаз или носа не наблюдалось. После появления респираторных признаков смерть обычно наступала в течение 2–4 дней. Ни одно из животных не подвергалось лечению в течение болезни.
Результаты вскрытия
В результате общего вскрытия животного, полученного живым, выявлены эмфизематозные легкие с многочисленными очагами кровоизлияния и бронхопневмонии. Селезенка была увеличена и имела заметные белые узелки по всей паренхиме. Печень имела обширные очаговые очаги некроза. Желудок, тонкий и толстый кишечник были пусты. Других сильных повреждений не было.
Гистологические срезы были подготовлены из легких, печени, почек, лимфатического узла и селезенки и были окрашены как гематоксилином и эозином. Схожие срезы окрашивали реактивом Шиффа. Изучение этих срезов показало, что в легких наблюдалась обширная пролиферация септальных клеток с очаговыми участками консолидации. Организмы H. capsulatum были обнаружены в многочисленных многоядерных клетках, единичных свободных альвеолярных макрофагах и в клетках эндотелия, выстилающих сосуды. К плевральной поверхности легких был прикреплен фибрин, что свидетельствует о наличии фибринозного плеврита. Печень содержала множественные очаговые гранулемы, характеризующиеся наличием многочисленных эпителиоидных клеток и смешанным скоплением воспалительных клеток в области портальных триад. Клетки эпителия в венозных каналах, а также отдельные гепатоциты содержали H. capsulatum. Селезенка имела очаговый некроз, небольшие абсцессы, множественные очаговые гранулемы и диффузно рассеянные эпителиоидные клетки, содержащие организмы H. capsulatum. Почка имела множественные очаговые зоны гломерулярного нефрита, характеризующиеся накоплением полиморфно-ядерных клеток в проксимальных канальцах. Агрегаты дрожжевых клеток H. capsulatum присутствовали в гломерулярных клетках эпителия. На срезах лимфатического узла отмечались заметно растянутые пазухи, содержащие много крупных эпителиальных клеток, которые были насыщены H. capsulatum (рис. 1).
Обследование остальных пяти животных показало, что у трех наблюдалась центрилобулярная дегенерация печени и незначительная или умеренная гиперемия легких. У остальных двух животных не было сильных поражений. Гистопатологические и культурные процедуры не выявили H. capsulatum у пяти замороженных животных. Pasteurella multocida была извлечена из легких животного с гистоплазмозом и у одного из других животных. Гистопатологические изменения, наблюдаемые у трех животных, были характерны для бактериальной пневмонии, а не для гистоплазмоза, который наблюдался у первого животного, подвергшегося вскрытию.
Обсуждение
Данное сообщение представляет собой первый зарегистрированный случай гистоплазмоза у шиншиллы (Chinchilla laniger) в Соединенных Штатах, хотя гистоплазмоз был зарегистрирован у шиншиллы в Швейцарии, которая была импортирована из Соединенных Штатов (1).
Поскольку гистоплазмоз был диагностирован только у одного животного из этой колонии в центральной части Миссури, то, по-видимому, это была случайная находка в этой группе шиншилл, а не основная проблема. Однако было невозможно получить диагностическую информацию о первых семнадцати погибших животных. Извлечение H. capsulatum из образцов сена указывает на то, что микроорганизм присутствовал в окружающей среде, из которой поступило сено, или что сено было загрязнено там, где оно хранилось. Подвал, в котором содержались животные и сено, находился в недавно построенном доме. Район, в котором находился дом, был покрыт лесами и, по-видимому, был местом ночлега для многих птиц. Вполне возможно, что гриб был возбужден при строительстве дома, заразив подвал. Однако, поскольку сено происходило из района центральной части штата Миссури, который, как известно, эндемичен для гистоплазмоза (7), может быть, что организм присутствовал в сене уже при доставке в дом.
Обнаружение множественных очагов гистоплазматической инфекции у животного, представленного живым, указывает на диссеминированную форму заболевания. Не было установлено, проявляли ли другие животные в колонии кожную реакцию на гистоплазмоз. Однако ни у одного из пяти других животных, предоставленных в лабораторию, не было гистологических повреждений гистоплазмоза. Недавние исследования показали, что шиншилла плохо реагирует на определенные антигены: альбумин сыворотки, O-клетки Salmonella typhosa и эритроциты барана. Похоже, что «сильные» антигены вызывают положительный ответ на антитела, тогда как «слабые» антигены, в которых основными антигенными составляющими являются полисахариды, выявляют мало или вообще не обнаруживают антитела (3). Клеточная стенка H. capsulatum состоит из большого количества полисахаридов (6). Это может указывать на то, что шиншилла не способна продуцировать иммунитет к H. capsulatum через систему производства антител к В-клеткам. Напротив, производство гуморального антитела может быть необязательным, поскольку иммунитет, индуцируемый у некоторых животных H. capsulatum, скорее клеточный, чем гуморальный, и зависит от ответа Т-клеточных лимфоцитов (2, 5). Фактически, у людей инфекция, по-видимому, связана с нарушением реакции Т-лимфоцитов (5). Распространенный тип инфекции, обнаруженный у шиншиллы, мог быть вызван отсутствием ответа лимфоцитов или большим количеством спор, подавляющих животное с нарушенной лимфоцитарной системой или без таковой. В настоящее время проводятся дополнительные исследования, чтобы определить характер восприимчивости шиншиллы к H. capsulatum.
![](/upload/000/u23/3/0/image-20200504000728-2.png)
Рисунок 1. Лимфатический узел с крупными эпителиоидными клетками, наполненными H. capsulatum. Реакция с йодной кислотой и реактивом Шиффа.
Хотя этот факт может быть случайным, данная ситуация подтверждает, что был обнаружен новый хозяин H. capsulatum, и документирует возникновение заболевания у шиншилл в Соединенных Штатах.
Мы благодарим Роберта Т. Хабермана, Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов, Вашингтон, округ Колумбия, за точную идентификацию Histoplasma capsulatum.
Это исследование было частично поддержано грантом Службы общественного здравоохранения RR00471.
Использованные источники
1. Burtscher, H., and E. Otte. 1962. Histoplasmose beim chinchilla. Dtsch. Tierarztl. Wochenschr. 69:303-:307.
2. Conant, N. F., D. T. Smith, R. D. Baker, and J. L. Callaway. Manual of clinical mycology, 3rd ed. W. B. B. Sanders Co., Philadelphia, Pa.
3. Hook, R. 1973. Humoral immune response of the adult chinchilla. Lab. Anim. Care 23:837-842.
4. Jungerman, P. F., and R. M. Schwartzman. 1972. Histoplasmosis, p. 110. In Veterinary mycology. Lea and Febiger, Philadelphia, Pa.
5. Kirkpatrick, C. H., J. W. Chandler, Jr., T. K. Smith, and W. M. Newberry, Jr. 1971. Cellular Immunologic Studies in Histoplasmosis, p. 371-:379. In A. Balows (ed.), Histoplasmosis: proceedings. Charles C Thomas, Springfield, Ill.
6. Kobayashi. G. S., and P. L. Guilacci. 1967. Cell wall studies of Histoplasma capsulatum. Sabouraudia 5:180-188.
7. Menges, R. W., M. L. Furculow, L. A. Selbvy R. T. Haberman, and C. D. Smith. 1967. Ecologic studies of histoplasmosis. Am. J. Epidemiol 85:108-119.
8. Menges, R. W., R. T. Haberman, L. A. Selbv, H. R. Ellis, R. F. Behlow. and C. D. Smith. 1963. A review and recent findings on histoplasmosis in animals. Vet. Med. 58:331-338.
DWIGHT R. OWENS, ROBERT W. MENGES, RONALD F. SPROUSE, WENDELL STEWART, AND BILLY E. HOOPER
College of Veterinary Medicine, University of Missouri-Columbia, Columbia, Missouri 65201
Принято для публикации 14 февраля 1975 г.
D. R. Owens, R. W. Menges,R. F. Sprouse, W. Stewart and B. E. Hooper. Naturally Occurring Histoplasmosis in the Chinchilla (Chinchilla laniger) // JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, May 1975, p. 486-488